TERAPIA CON STEM CELLS EN ENFERMEDAD CEREBROVASCULAR

Las células madre son un tipo de células especiales que presentan la capacidad de dividirse indefinidamente, autorrenovarse y diferenciarse en varios tipos celulares. Distintas fuentes de células madre están siendo utilizadas para la futura regeneración del cerebro dañado y para mejorar funciones neuronales después de una isquemia en modelos animales.

Tipo de stem cell: 
Células mesenquimales autólogas

Método de obtención: 
Reprogramación de factores

Usos: 
Recuperación funcional casi en su totalidad, regeneración de tejido neuronal e inhibición de los efectos del proceso inflamatorio, tratamiento para embolismos.

Resultados:

♥ Corto plazo: Los síntomas se mantienen durante el primer mes de tratamiento.

♥ Largo plazo: Recuperación casi en su totalidad con secuelas mínimas

Sánchez Adolfo.Aplicación de células mesenquimales autólogas como adyuvante en el tratamiento de embolia cerebral. Células madres y medicina biorregenerativa.Volumen 1(1), 2014;1-5 [15 de diciembre del 2016].

EJEMPLO DE TRANSGÉNICO ANIMAL EN ENFERMEDAD CEREBROVASCULAR

TNFα - TransgenicRat

Se ha comenzado a utilizar transgénicos de ratas que sobreexpresan un gen TNF - murino, bajo el control de su propio promotor, para investigar el impacto de TNFa cuando está crónicamente elevado, en la función sináptica del hipocampo.
La viabilidad neuronal y la recuperación cognitiva en ratas TNFa (Tg) mostraron significativamente mayores niveles de potenciación a largo plazo (LTP) en respuesta a una estimulación de 100 Hz. Lo que sugiere que las redes sinápticas pueden ser hiperexcitabilitadas cuando existe TNFa elevado.

FUENTE: Pettigrew LC, Kryscio RJ, Norris CM (2016) The TNFα-Transgenic Rat: Hippocampal Synaptic Integrity, Cognition, Function, and Post-Ischemic Cell Loss. PLoS ONE 11(5): e0154721. doi:10.1371/ journal.pone.0154721.

ADN RECOMBINANTE EN ENFERMEDAD CEREBROVASCULAR

ADN RECOMBINANTE
(Artificial)

♥ Eritropoyetina humana recombinante (EPOhr)

El mecanismo molecular por el cual se estimula su producción es a través de los factores inducibles por la hipoxia. Estos se activan a partir de sensores de la membrana celular y disparan señales moleculares, que activan la replicación de genes que intervienen en la síntesis de la molécula. La eritropoyetina también tiene la propiedad de reducir el daño celular a través del flujo de purinas y de esta forma reduce el número de células que entran en la apoptosis y este mecanismo ampliamente aceptado como cardioprotector contra la isquemia aguda, otras vías han sido demostradas.

ADN RECOMBINANTE
(En la naturaleza)

♥ Un ejemplo de ADNr es el mecanismo de recombinación de las  bacterias lo cual es basado en tres procesos; transformación, conjugación y transducción, la existencia de estos mecanismos permite la construcción de nuevos mapas genéticos de bacterias a partir del original a través de una mutación, dos moléculas de ADN pueden intercambiar segmentos y dar lugar a la aparición de nuevas combinaciones genéticas. Las bacterias y los virus, tienen mecanismos de recombinación lo que les permite aumentar su patogenia al poder resistir y evadir la respuesta inmune des huésped.

FUENTE: Zanlungo S, Arrese M, Rigotti, A. Medicina molecular: Presente y futuro. Revista Médica de Chile [Internet]. 2000 [citado 27 noviembre 2015]; 127 (8).

Recombinación genética en procariontes. (acceso el 14 de junio de 2015)

Ministerio de Educación-Gobierno de España [Internet]. ADN recombinante o clonación celular. Proyecto Bisofera [Internet]. 2008 [citado 27 noviembre 2015]; 127 (8).

Baute Gómez Alwjandro. Medisur. Revista Científica de las Ciencias Médicas en Cienfuegos. Eritropoyetina humana recombinante e isquemia aguda miocárdica y cerebral: sus implicaciones para el uso clínico. [Internet] 2010.

TÉCNICAS DE HIBRIDACIÓN Y DE SECUENCIACIÓN EN ENFERMEDAD CEREBROVASCULAR

Valora la presencia de fragmentos con una secuencia de nucleótidos concreta. Incluye las técnicas de Southern blot (ADN), Northern blot (ARN).

Micro RNA 21

Se realizó la hibridación in situ y microdisección con la RT-PCR para determinar la expresión y el papel que cumple 21-microARN (miR-21) después de una ECV. La hibridación reveló que el miR-21 hizo una regulación positiva de expresión en las neuronas de la zona límite isquémica, y el análisis cuantitativo en tiempo real de RT-PCR reveló que el accidente cerebrovascular aumentó los niveles de miR-21 aproximadamente tres veces en las neuronas aisladas a partir de la zona de frontera isquémica.

FUENTE: FEBS J. 2010 Oct https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20840605

http://www.neurowikia.es/content/diagn%C3%B3stico-anatomopatol%C3%B3gico-y-t%C3%A9cnicas-de-biolog%C3%AD-molecular-en-tumores-primarios-del-sn

PRUEBA DEL PCR EN ENFERMEDAD CEREBROVASCULAR

El parásito Trypanosoma cruzi, es una de las muchas causas de ECV y éste es detectable gracias a una prueba confirmatoria de PCR: 

FUENTE: Davies, Carolina, et al. Detección de Trypanosoma cruzi en tejido y sangre murina por PCR convencional y en tiempo real. Acta bioquímica clínica latinoamericana, 2014, vol. 48, no 4, p. 421-428.

PRUEBA DE TAMIZAJE Y PRUEBAS CONFIRMATORIAS DE ENFERMEDAD CEREBROVASCULAR

Pruebas de Tamizaje para ECV:

Las pruebas de tamizaje permiten, de manera no tan específica pero estandarizada, conocer el estado en el que se encuentra determinado grupo poblacional en torno a una enfermedad.

Escala de evaluación Cincinnati:

Escala de evaluación Los Ángeles:

Pruebas confirmatorias de ECV:

• Tomografía computarizada
• Resonancia magnética
• Angiografía 
• Electroencéfalograma (EEG)
• Exámen de respuesta evocada
• Ultrasonido Doppler
• Fonoangiografía carotídea

FUENTE: Gauch E.C, MD, Saber J.L. MD, Adams H.P. MD, et al. Guidelines for the early management of patients with acute ischemic stroke: A guideline for healthcare professionals from the American Heart Association/ American Stroke Association.Stroke 2013 

http://www.hgm.salud.gob.mx/descargas/pdf/area_medica/medinterna/guias_diagnosticas/6_enfervascular.pdf

http://www.texasheart.org/HIC/Topics_Esp/Cond/strokdsp.cfm

ALTERACIONES DE LA EPIGENÉTICA DE ENFERMEDAD CEREBROVASCULAR

Los procesos epigenéticos están influenciados por señales ambientales, lo cual explica la interacción genes y ambiente en la fisiopatología del ictus cerebral.

Metilación del ADN 

Implicado en respuestas al estrés relacionadas con la fisiopatología del ictus cerebral. Se observó:

• Hipometilación global del ADN 
• Alteraciones en la metilación de ADN en promotores de genes que influyen en la vulnerabilidad de sufrir ictus, entre los cuales están: MTHFR, KCC1, THBS1, ER.
• Enfermedad de Fabry, síndrome de Prader-Willi e imprinting del locus genómico GNAS.

Modificaciones de histonas

• Niveles de acetilación en las histonas, y el consiguiente estado de la cromatina alterados.
• Asociado a: excitotoxicidad, estrés oxidativo, inflamación, regulación del ciclo celular, reparación de ADN y apoptosis. Factores de mayor riesgo.
• Aterosclerosis, displasia inmuno-ósea de Schimke, lupus eritematoso sistémico.

ARN no codificante:

microRNAs

• Actúan en procesos post-isquémicos del cerebro y la expresión de miRNA alterada después de ACV.

IncRNAs

• Modula marco epigenético post-isquémico a través de interacciones con proteínas modificadoras de la cromatina y la unión a correpresores transcripcionales.
• IncRNAs asociados a fisiopatología del ictus cerebral: GOMAFU, ANRIL. 

Otros factores:

• Fumar, alcoholismo, drogas ilícitas, inactividad física, obesidad, píldoras anticonceptivas.

FUENTE: Iracema Caballero Muñoz-Grado de Biotecnología-Universidad Autónoma de Barcelona. https://ddd.uab.cat/pub/tfg/2015/142551/TFG_iracemacaballeromunoz.pdf

http://www.texasheart.org/HIC/Topics_Esp/Cond/strokrsp.cfm